小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的使用要小心加謹(jǐn)慎

　　小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的關(guān)鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲細(xì)胞系的生長(zhǎng)。昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補(bǔ)加FBS,血清提供了細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量元素,使細(xì)胞能健康生長(zhǎng)和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點(diǎn):價(jià)格高；每批血清的質(zhì)量不同,影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和病毒復(fù)制；血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難；血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養(yǎng)基變得很復(fù)雜。因此,無(wú)論工業(yè)上或?qū)W術(shù)上,開發(fā)無(wú)血清培養(yǎng)基都是必然的趨勢(shì)。
 

　　由于在無(wú)血清培養(yǎng)基中含有從血清或動(dòng)物臟器中純化的蛋白成分,如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分離純化的難度和成本。細(xì)胞在無(wú)血清低蛋白或無(wú)蛋白培養(yǎng)基環(huán)境中對(duì)剪切應(yīng)力更為敏感,故需適當(dāng)提高保護(hù)劑的濃度。無(wú)血清培養(yǎng)基的應(yīng)用有時(shí)會(huì)降低重組蛋白的產(chǎn)量,在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi),較高的細(xì)胞生長(zhǎng)密度與相對(duì)較低水平的重組蛋白產(chǎn)量這一事實(shí)表明,促進(jìn)細(xì)胞分裂的因子與促進(jìn)重組蛋白生產(chǎn)的桿狀病毒感染晚期起作用的因子是不盡相同的。
 

　　小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基旨在用于大規(guī)模擴(kuò)增草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)細(xì)胞系，也常用于通過(guò)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(BEVS)進(jìn)行蛋白表達(dá)。 IPL-41培養(yǎng)基是對(duì)原始IPL配方的改良，用于大規(guī)模擴(kuò)增草地貪夜蛾衍生細(xì)胞系。Weiss向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入了胎牛血清和TPB培養(yǎng)基(Tryptose Phosphate Broth)，成功地實(shí)現(xiàn)了IPL-21 AE (III)細(xì)胞系的大規(guī)模連續(xù)培養(yǎng)。該培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)和維護(hù)鱗翅類衍生細(xì)胞系和擴(kuò)增這些細(xì)胞系的病毒。IPL-41培養(yǎng)基基礎(chǔ)也以用于無(wú)血清夜蛾細(xì)胞的桿狀病毒重組蛋白表達(dá)。